Alliance™ iS HPLC System运行USP杂质分析方法的高利用率和耐用性

许多受法规监管的实验室都面临着仪器利用率高、产品交付时间紧迫等压力，因此需要可靠、耐用的高效液相色谱(HPLC)系统。面对这些类型的限制，受法规监管的实验室需要一套能够长时间运行并尽可能减少停机时间的HPLC系统。在提高HPLC系统利用率的同时，还必须产生可靠的高质量结果。Alliance iS HPLC System是一款精简的系统，其功能有助于减少系统操作中的人为错误，从而减少重新运行分析的需要。Alliance iS HPLC System的现代化界面就是一个例子，该界面提高了系统的易用性，使HPLC用户可以尽可能延长系统的正常运行时间和提高效率。在本应用纪要中，使用Alliance iS HPLC System连续40天运行USP氟康唑有机杂质分析方法，获得了一致、准确的结果¹。在研究过程中，每天监测系统适应性溶液和含杂质的氟康唑样品，评估系统适应性。

优势

• Alliance iS HPLC System能够长时间高效运行
• Alliance iS HPLC System在长时间运行后仍可提供准确的分析结果
• Alliance iS HPLC System可在USP杂质分析中发挥出色的方法耐用性和一致性

许多受法规监管的实验室都需要可靠、耐用的仪器来满足日益增长的仪器利用率和紧迫的产品交期要求。面对这些类型的限制，受法规监管的实验室需要能够长时间运行并尽可能减少停机时间或利用率高（系统运行时间大于75%）的HPLC系统。在发挥高利用率的同时，还必须产生可靠的高质量结果。为解决效率和耐用性挑战，一种方法是实施现代化技术，其功能有助于减少系统操作中的人为错误，从而减少重新运行分析的需要。Alliance iS HPLC System旨在提高HPLC系统的易用性，使HPLC用户可以尽可能延长系统的正常运行时间和提高效率²。 通过实施现代化界面和系统运行前检查，Alliance iS HPLC System能够提高HPLC系统的耐用性并延长正常运行时间，从而提高分析生产率³。 本应用纪要将展示Alliance iS HPLC System连续40天运行USP氟康唑有机杂质分析方法仍然获得了一致、准确的结果。在研究过程中，每天监测系统适应性溶液和含杂质的氟康唑样品，评估系统适应性。

样品描述

按照USP各论方法使用流动相（80:20水:乙腈）制备氟康唑标准品溶液，各化合物的最终浓度为10 µg/mL。标准品溶液中包括相关化合物A（Sigma-Aldrich，P/N：PHR1651-30 MG）、相关化合物B（Sigma-Aldrich，P/N：PHR1862-20 MG）、相关化合物C（Sigma-Aldrich，P/N：PHR1826-20 MG）和氟康唑（Sigma-Aldrich，P/N：PHR1160-1 G）。系统适应性溶液与标准品溶液相同，因此系统适应性溶液也使用了与标准品溶液相同的溶液。称取过期的参比标准品（Sigma，P/N：F8929-100 mg），用流动相制成最终浓度为3 mg/mL样品溶液。

方法条件

质量控制(QC)实验室在产品放行方面面临着严格的期限要求。Alliance iS HPLC System采用现代技术，有助于满足严格的要求，按时放行产品。Alliance iS HPLC System经过专门设计，旨在应对受法规监管的QC实验室所遇到的挑战⁴。 本应用将一台Alliance iS HPLC System在等度条件下运行USP氟康唑有机杂质分析方法连续40天，在此期间，每24小时进行一次系统适应性分析，确保系统于受控状态下正常运行。

USP各论中的系统适应性要求是评估HPLC系统以确保系统正常运行。对于USP氟康唑有机杂质分析方法，系统适应性要求规定，系统适应性溶液中相关化合物B与相关化合物C之间的分离度不得低于(NLT) 1.5。此外，系统适应性溶液中所有化合物的峰面积和保留时间%RSD不得大于(NMT) 5.0%。系统适应性溶液中包含以下四种化合物：相关化合物A、相关化合物B、相关化合物C和氟康唑（图1）。使用USP氟康唑有机杂质分析方法在Alliance iS HPLC System上进行了为期40天的测试。系统适应性溶液在整个40天内获得的数据见表1，结果表明，Alliance iS HPLC System能够轻松、稳定、可靠地满足USP氟康唑有机杂质分析方法在分离度、峰面积%RSD和保留时间%RSD方面的系统适应性要求。

在要求满足系统适应性要求的同时，我们还通过监测结果评估了长期性能，确保Alliance iS HPLC System在40天的分析过程中处于受控状态。利用控制图来分析从系统适应性溶液收集到的全部数据，在图中监测数据点是否全都在平均值的+/-3σ范围内。图2的系统适应性结果显示了系统运行40天内相关化合物B与相关化合物C之间的分离度。所有分离度值均在平均值的+/-3σ范围内，且平均值的+/-3σ也在NLT 1.5的系统适应性要求范围内。

图3显示了40天内相关化合物A保留时间%RSD的系统适应性结果控制图。相关化合物A的结果远低于要求的NMT 5.0%，所有值均低于0.3%，处于“受控”状态，所有数据均在平均值的+/-3σ范围内。其余化合物（相关化合物B、相关化合物C和氟康唑）的保留时间%RSD结果均远低于要求的NMT 5.0%，处于受控状态，如表1所示。最后一项系统适应性要求针对的是各化合物的峰面积%RSD。图4的控制图中显示了相关化合物B的峰面积%RSD结果。所有化合物的结果均低于要求值，所有峰面积%RSD值均低于0.6%。Alliance iS HPLC System的所有结果均符合系统适应性要求且处于控制范围内，在整个40天的研究中表现出一致且可重现的性能。

QC实验室不仅需要满足方法的系统适应性要求，还需要可靠地分析样品。使用Alliance iS HPLC System，系统能够始终如一地满足系统适应性要求，并在40天的研究过程中可重现且可靠地分析样品溶液。氟康唑样品溶液含有两种杂质：相关化合物A和一种未知杂质（图5）。每种杂质的定量分析根据USP各论进行计算³。 在为期40天的研究中，相关化合物A的平均计算值为0.002%（图6），未知杂质的平均计算值为0.374%（图7）。样品溶液中每种杂质的所有结果均记录在控制图中，从图中可以看出，定量结果完全处于平均值的+/-3σ范围内，表明Alliance iS HPLC System在整个研究过程中都处于受控状态。

在Alliance iS HPLC System上长期运行USP氟康唑有机杂质分析方法，以证明Alliance iS HPLC System的耐用性和重现性。连续40天用Alliance iS HPLC System运行USP氟康唑杂质分析方法，每24 h分析一次系统适应性溶液以及样品溶液。在整个40天的运行过程中，Alliance iS HPLC System分析系统适应性溶液和样品溶液中的杂质都获得了可重现的结果。对于QC实验室而言，可重现的结果是确保按时放行高质量产品的关键。实验证明，Alliance iS HPLC System能够提供QC实验室所需的可靠的高质量结果。

1. USP, Fluconazole.United States Pharmacopeia and Formulary (USP 43-NF38) 2020, (GUID-F961B739-9D37-4719-8E8A-1E7474DFE57D_3_en-US).
2. Alliance iS HPLC System
3. Zhang X, Birdsall R, You Y, 使用Waters ACQUITY UPLC PLUS系列提高生物药物分离的稳定性.沃特世应用纪要, 720006285ZH, 2018年.
4. Francis D, 提高QC实验室效率.沃特世白皮书, 720008074ZH, 2023年.