• 应用纪要

从肝组织中高效回收寡核苷酸

从肝组织中高效回收寡核苷酸
  • Kim Van Tran
  • Mary Trudeau
  • Matthew A. Lauber
  • Waters Corporation
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摘要

本应用简报提供了从组织样品中提取治疗性寡核苷酸进行定量分析的相关指导，并展示了从肝组织中高效回收寡核苷酸的效果。

实验

下图（图1）总结了我们在内部使用OligoWorks SPE微孔板试剂盒进行溶剂辅助组织匀浆和寡核苷酸萃取的工作流程和方案。请注意，匀浆组织的质量(mg)与匀浆混合物（包括RapiZyme蛋白酶K酶解试剂、缓冲液和溶剂）总体积(mL)之间的比率为1:10。

寡核苷酸组织萃取工作流程和方案，使用溶剂辅助组织匀浆，然后使用RapiZyme蛋白酶K酶解模块和OligoWorks SPE微孔板（2 mg/孔）进行酶解。注：文中所提到的设备为本实验室在用设备，但用户也可以使用具有相同性能的替代设备
图1.寡核苷酸组织萃取工作流程和方案，使用溶剂辅助组织匀浆，然后使用RapiZyme蛋白酶K酶解模块和OligoWorks SPE微孔板（2 mg/孔）进行酶解。
注：文中所提到的设备为本实验室在用设备，但用户也可以使用具有相同性能的替代设备。

LC-MS分析

结果与讨论

OligoWorks SPE微孔板的性能展示，使用0.05 g组织/0.5 mL蛋白酶K酶解模块试剂（匀浆并在55 °C，600 rpm下酶解2 h），并使用OligoWorks SPE微孔板试剂盒（包含OligoWorks RapiZyme蛋白酶K酶解模块和OligoWorks SPE微孔板，2 mg/孔）纯化100 µL组织上清液，寡核苷酸回收率> 70%
图2.OligoWorks SPE微孔板的性能展示，使用0.05 g组织/0.5 mL蛋白酶K酶解模块试剂（匀浆并在55 °C，600 rpm下酶解2 h），并使用OligoWorks SPE微孔板试剂盒（包含OligoWorks RapiZyme蛋白酶K酶解模块和OligoWorks SPE微孔板，2 mg/孔）纯化100 µL组织上清液，寡核苷酸回收率> 70%。

订购信息

特色产品

720008270ZH，2018年4月

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